产品名称:人甲胺喋呤试剂盒
英文名称:Human methotrexate,MTX ELISA KIT
产品规格:96人份/48人份
保存条件:2-8℃
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
主要作用:科研
产品用途:For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免费代测服务.
检测原理: 采用双抗体夹心ABC-ELISA法
产品种属齐全有:人,小鼠,大鼠,豚鼠,猪,犬,兔,牛,羊,猴,兔,马等动物种属。
待检样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。
公司名称:上海恒远生物科技有限公司
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联 系 人:王
操作步骤:
用于检测未知抗原的双抗体夹心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
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