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    酸化血清溶血试验技术分析

    更新时间:2013-04-01 点击量:3053
    实验原理
      阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者的红细胞由于膜的缺陷,对补体的敏感性增加,这些对补体敏感的红细胞能被正常血清 所溶解,特别在血清 酸性条件下(pH6.4-6.5)经37℃孵育,溶血更明显。

    实验方法
      材料:
      1.0.25mol/LHCL
      2.0.85%生理盐水
      3.离心机 、试管 、水浴 箱等
      方法:
      1.取静脉血2-3ml,取下针头,将血轻轻注入试管 中;
      2.离心吸出血清备用;
      3.将血块捣碎,用生理盐水洗涤3次,配成50%红细胞悬液备用;
      4.按下表进行操作;

    待测管(ml)
    对照管(ml)
    0.5
    /
    0.025
    0.025
    /
    0.5
    0.05
    0.05

      5.两管均加塞,置37℃水浴 箱中1h后直接观察或者离心后观察结果。
     
    实验结果计算
      溶血为阳性,不溶血为阴性

    注意事项
      1.本实验不用抗凝血,因抗凝剂会阻碍溶血,降低敏感性,出现假阴性;
      2.血清酸化后立即塞紧管口,以防二氧化碳逸出;
      3.血清需新鲜,以免补体失活,造成假阴性;
      4.实验用具要干燥,针头要粗,红细胞悬液要直接滴入液体,不要沿管壁流下,以免溶血。

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