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    人超氧化物歧化酶试剂盒操作步骤

    更新时间:2011-10-19 点击量:2088

    产品名称:人超氧化物歧化酶试剂盒
    产品规格:96人份/48人份
    保存条件:2-8℃
    检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
    经营种类:进口分装和原装
    检测原理: 采用双抗体夹心ABC-ELISA法
    产品用途:For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免费代测服务.
    公司名称:上海恒远生物科技有限公司

    联 系 人:杨
    公司:http://www.himeijia.cn

    检测范围:                                             

    5U/mL -150U/mL  

    人超氧化物歧化酶试剂盒操作步骤

    1.         标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为120U/mL,80U/mL ,40U/mL,20U/mL, 10U/mL)。

    2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3.         温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4.         配液:将3048T20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水3048T20倍)倍稀释后备用。

    5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7.         温育:操作同3。

    8.         洗涤:操作同5。

    9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

    10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。                                  

    试剂盒性能:

    1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。

    2.批内与批见应分别小于9%15%                           

    保存条件及有效期:

    1.试剂盒保存:2-8。

    2.有效期:6个月

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